Production, purification and characterization of an exo-polygalacturonase from Penicillium janthinellum sw09

RESUMO

Penicillium janthinellum sw09, isolado do solo, produz quantidades significativas de uma pectinase extracelular que foi posteriormente caracterizada como exo-poliga­lacturonase (exo-PG). Ao otimizar as condições de crescimento, P. janthinellum sw09 produz quantidades elevadas de exo-PG (16,54 unidades/ml). A enzima im­pura foi purificada por cromatografia de filtração em gel e dois picos com atividade elevada de exo-PG (designa­dos como PGI e PGII) foram revelados. Por análise em SDS-PAGE, PGII foi purificada utilizando uma coluna de DEAE-Sepharose FF, observou ser formada por uma única banda com uma massa molecular de 66,2 kDa. PGII purificada exibiu uma actividade máxima a uma temperatura de 45 °C e pH 5,0. Os perfis de estabilidade mostram que PGII é mais estável numa faixa de pH de 4,0-8,0 e abaixo de 60 ° C. O Km e Vmax para a enzima foi de 1,74 mg / ml e 18,08 μmol / (mL • min), respecti­vamente. Devido a esta caracterização enzimática, pecti­nase é um candidato atrativo para ser aplicado na degra­dação da pectina.

Palavras-chave: Penicillium janthinellum; poligalactu­ronase; purificação; caracterização